RNA純化試劑盒說明書
RNA Cleanup Kit
RNA純化試劑盒
Cat. No. K0589
保存：室溫
組分說明
Catalog no. K0589
Kit Size 20
Buffer RL 20 ml
Buffer RW2（concentrate） 11 ml
RNase-Free Water 10 ml
Spin Column RS 20
Collection Tube（1.5 ml） 20
Collection Tube（2 ml） 20
產品簡介
本試劑盒使用*的離心吸附柱，在高鹽條件下 RNA 與硅基質膜高效、專一地結合，適用于從酶促反應及其他多種方法提取的 RNA 溶液中進一步純化和濃縮 RNA，并將 RNA 樣品進行脫鹽處理，有效回收得到高純度的 RNA。該試劑盒最小可以將 RNA 樣品濃縮至 30-50 µl，回收得到的 RNA 可直接用于微點陣分析和 Real-time PCR 等敏感實驗。
注意事項
1. 預防RNase污染，應注意以下幾方面：
1）使用無RNase的塑料制品和槍頭，避免交叉污染。
2）玻璃器皿應在使用前于180℃高溫下干烤4小時，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分鐘，用水*沖洗后高壓滅菌。
3）配制溶液應使用無RNase的水。
4）操作人員戴一次性口罩和手套，實驗過程中要勤換手套。
2. 第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在 Buffer RW2 中加入無水乙醇。
3. Buffer RL 如果產生沉淀，請加熱使其溶解后放置。
4. 所有離心步驟均在室溫下進行，且所有操作步驟動作要迅速。
自備試劑：無水乙醇（新開封或提取RNA專用）
操作步驟
1. 用 RNA-Free Water 調整樣品至總體積至 100 μl，加入 350 μl Buffer RL，充分混勻。
2. 加入 250 μl 無水乙醇，混勻。
3. 將得到的溶液700 μl轉移到吸附柱（Spin Column RS）中（吸附柱已裝入收集管 2 ml Collection Tube 中），10,000rpm（~11,500 x g）離心20秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
4. 向吸附柱中加入500 μl Buffer RW2（用前檢查已加入無水乙醇）, 10,000 rpm 離心20秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
5. 重復步驟4。
6. 將吸附柱放回收集管中，12,000 rpm離心1分鐘。
7. 將吸附柱裝入新的RNase-Free 1.5ml收集管中，向吸附膜的中間部位加入30-50 μl RNase-Free Water，室溫放置1分鐘，12,000 rpm離心1分鐘，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。
注意： RNase-Free Water最好在70℃預熱，確保RNA洗脫充分；洗脫體積不應小于30 μl，體積過小影響回收率。
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