日本黄色三级免费网址,色呦呦在线观看91精品,三级久久黄色播放视频,亚洲国产欧美日韩精品推荐

當(dāng)前位置:
首頁 > 資料下載 > β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase)試劑盒說明書
目錄導(dǎo)航 Directory
服務(wù)熱線
資料下載Down

β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase)試劑盒說明書

提 供 商: 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 資料大?。?/td>
圖片類型: 下載次數(shù): 175 次
資料類型: PDF 瀏覽次數(shù): 1598次
相關(guān)產(chǎn)品:
文件下載    
詳細(xì)介紹

β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)試劑盒說明書

微量法

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。

測定原理:

β-1,3-GA 水解昆布多糖,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產(chǎn)生還原末端,通過測定還原糖生成速率來計算其酶活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存;

試劑二:液體 30mL×1 瓶,4℃保存;

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或 200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);12000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至550nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):

試劑名稱(μL)

測定管

對照管

樣本

35

35

蒸餾水

 

35

試劑一

35

 

充分混勻,放入 37℃水浴 60 min

試劑二

230

230

充分混勻,95℃水浴 5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中, 550nm處記錄各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)),ΔA=A 測定-A 對照。每個測定管需設(shè)一個對照管。

β-1,3-GA 活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y=0.0958x-0.0192;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。

(1) 按蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每小時產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個酶活性單位。

β-1,3-GA(mg/h/mg prot)=[(ΔA+0.0192)÷0.0958×V1]÷(V1×Cpr)

=10.438×(ΔA +0.0192)÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每小時產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個酶活性單位。

β-1,3-GA(mg/h/g 鮮重)=[( ΔA +0.0192)÷0.0958×V1]÷(W×V1÷V2)

= 10.438×(ΔA +0.0192)÷W

(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每小時產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個酶活性單位。

β-1,3-GA(mg/h /104cell)= [( ΔA +0.0192)÷0.0958×V1]÷(500×V1÷V2)

=0.0208×(ΔA+0.0192)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.035mL;V2:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

b.用96孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y =0.0479x-0.0192;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。

(1) 按蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每小時產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個酶活性單位。

β-1,3-GA(mg/h/mg prot)= [(ΔA +0.0192)÷0.0479×V1]÷(V1×Cpr)

=20.876×(ΔA +0.0192)÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每小時產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個酶活性單位。

β-1,3-GA(mg/h/g 鮮重)= [(ΔA +0.0192)÷0.0479×V1]÷(W×V1÷V2)

= 20.876×(ΔA +0.0192)÷W

(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每小時產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個酶活性單位。

β-1,3-GA(mg/h /104cell)= [(ΔA +0.0192)÷0.0479×V1]÷(500×V1÷V2)

=0.0416×(ΔA+0.0192)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.035mL;V2:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

總抗氧化能力試劑盒說明書可見分光光度法

滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

2020国自产拍精品网站| 久久久久久亚洲一区二区| 91香蕉在线观看影视| 日本动漫精品v毛片大全| 久久99老妇伦国产熟女高清| 97精品国产自产在线观看| 久久精品国产亚洲高清| 亚洲精品在线观看日本国产| 中文字幕日韩在线高清欧美| 午夜福利国产观看视频1| 韩漫漫画在线免费看视频| 日日摸夜夜摸狠狠摸婷婷| 九七成人操碰人人看小视频| 日本午夜免费福利视频| 国语自产拍无码精品视频在线| 欧美日韩专区一区二区| 亚洲成人免费久久av| 亚洲欧美另类色视频| 欧洲在线观看亚洲三区| 亚洲国产精品无码久久久高潮| 欧美日韩视频免费看| 丰满少妇爽视频一区二区三区| 中文字幕精品资源站| 中文字幕字幕一区二区三区| 神马午夜久久久久久| 国产性生活视频免费| 国产一级二级三级在线观看| 国产成人亚洲综合91精品首页| 亚洲精中文字幕二区三区| 午夜亚洲在在线观看| 国产视频网站在线不卡| 久久久精品熟女亚洲av麻豆| 国产精品一区二区三区三级天堂| 2018在线不卡爱视频| 亚洲男人天堂成人网| 国产日欧一片内射午夜| 午夜精品久久久久久久久久久| 一区二区三区四区欧美日韩亚洲| 99亚洲视频一区二区| 2021久久国自产拍精品| 日韩欧美一级视频观看|