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雌激素試劑盒問題解析
更新時間：2018-06-15 點擊次數(shù)：1837次
試劑的選擇，選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。加樣中可能遇到的問題，在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法好是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理。
洗板時容易造成誤差，因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以好多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動。顯色問題： 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應(yīng)的時候，要先查看顯色劑本身的情況。終止反應(yīng)：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒。
雌激素試劑盒處理及要求，血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
雌激素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）往預(yù)先包被(E)elisa檢測,雌激素捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(E)elisa檢測,雌激素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）計算樣品濃度。
