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豬細小病毒抗體檢測試劑盒
豬細小病毒抗體檢測試劑盒
更新時間:2025-02-06
訪問量: 2316
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家

豬細小病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)*中垂詢!

豬細小病毒抗體檢測試劑盒產(chǎn)品概述:

豬細小病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:豬細小病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱:Porcine Parvovirus Antibody Test Kit (ELISA), PPV Ab

規(guī)格】

96×2測試/盒

【預期用途】

 本試劑盒用于定性測定豬血清中細小病毒IgG抗體。用于評估豬場豬細小病毒疫苗免疫狀況以及感染豬的血清學診斷。

【檢驗原理】

 本試劑盒應用固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理,由包被有高純度的豬細小抗原的微孔反應板、辣根過氧化物酶標記的抗豬IgG及其它試劑配套組成。其反應機理為包被抗原與樣本中的PPV-IgG結(jié)合,再與酶標抗豬IgG抗體形成“包被抗原+PPV-IgG+酶標抗豬IgG抗體”復合物,加入顯色劑,通過酶催化反應顯色。顯深淺與PPV-IgG的量成正比,當顯色超過設定的臨界值時結(jié)果判為陽性,表明免疫有效或有自然感染。

【主要組成成份】

1

PPV抗原包被板

96T×2

2

酶標記物

22ml

色帽

3

樣本稀釋液

50ml

透明

4

PPV-IgG陰性對照血清

1.5ml

綠色帽

5

PPV-IgG陽性對照血清

1.5ml

紅色帽

6

顯色劑

12ml×2

色帽

7

終止液

12ml

色帽

8

20X濃縮洗滌液

50ml

白色帽

9

蓋板膜

2張

 

10

說明書

1份

 

自備器材

1.酶標儀( 450nm  630nm濾光片

2.微量移液器(單道1-100ul、0.5-10ul、多道      30-300ul)

3.水浴箱或恒溫箱

4.微量振蕩器

5.一次性槍頭(10ul、200ul)

6.去離子水

【樣本要求】

1.本試劑檢測的樣本為豬血清,樣本應無菌采集,2℃~8℃貯存不超過一周,長期應在-20℃以下保存,避免反復凍融。

2.避免使用嚴重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及污染長菌的樣本。

【實驗準備】

1.試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前,先取出置室溫30min。酶標板應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可拆開。

2.樣本稀釋用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋(例:將5ul樣本加至195ul樣本稀釋液中)。

3.配制洗滌液將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍(例:將50ml洗滌液加入950ml去離子水中)。若20倍濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶,屬正?,F(xiàn)象,放置37℃至溶解后即可。

操作步驟

1.加樣:根據(jù)樣本數(shù)量,取所需板條。設陰、陽性對照各2孔,分別加入不稀釋的陰、陽性對照血清100μl于相應孔中。其余為樣本孔,每孔加入稀釋好的樣本100μl。

2.溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置37℃溫育30分鐘。

3.洗板:打開蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液注滿反應板孔,洗滌3次,每次停留10秒,后一次洗后拍干。

4.加酶:每孔加酶標記物100μl

5.溫育:加好酶標記物后,蓋好蓋板膜,置37℃溫育30分鐘。

6.洗板:同步驟3。

7.顯色:每孔加顯色劑100μl,蓋好蓋板膜,振蕩混勻,37℃避光反應10分鐘。

8.終止:打開蓋板膜,每孔加終止液50μl,振蕩10秒,充分混勻。終止后即讀數(shù)。

9.讀數(shù):以450nm/ 630nm雙波長檢測,讀取各孔吸光度值(OD值)。

 

【結(jié)果判定】

在酶標儀上測各孔的OD值。檢測結(jié)果有效的條件是陽性對照孔的平均OD值≥0.6,陰性對照孔的平均OD值必須<0.1。

樣品中抗體存在與否,或樣本中抗體的相對水平的高低由S/P值決定,S/P值計算時按以下方式處理:

  S/P=(樣本OD450/630值-NCx(—))/(PCx(—)-NCx(—)),其中NCx(—)表示陰性對照孔平均OD450/630值(0.05以下的數(shù)值按0.05計算),PCx(—)表示陽性對照孔平均OD450/630值;

當樣本的S/P≥0.2時判為陽性;樣品S/P值<0.2時判為陰性;

【注意事項】

1.本試劑盒僅用供研究使用。

2.使用試劑盒之前,一定要仔細閱讀說明書。

3.實驗廢棄物應經(jīng)121高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

4.未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封4℃保存。未用完的液體試劑應蓋好瓶蓋,與其它配套組份放入試劑盒中于2℃-8℃避光保存。不同批號的試劑組份不可混用。

5.應用微量移液器加入本及試劑,并經(jīng)常校對其準確性。

6.加洗滌液時應做到滿而不溢,防止孔口有游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。

7.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水沖洗干凈。

【儲存條件及有效期】

于2℃~8℃避光保存,防止冷凍,有效期12個月。

【生產(chǎn)日期及批號】

詳見包裝袋和外包裝盒。

 

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